AcasăDocument
NORMĂ din 15 februarie 2006(*actualizată*)
privind condiţiile de sănătate a animalelor ce guvernează mişcarea ecvideelor şi importul lor din ţări terţe (actualizată până la data de 23 februarie 2010*)
Abrogat
Emitent:AUTORITATEA NAŢIONALĂ SANITARĂ VETERINARĂ ŞI PENTRU SIGURANŢA ALIMENTELOR
Publicat:23.02.2010
Versiune:actualizata
Sursă oficialăPrevizualizare publică. Creează cont gratuit pentru versiuni istorice și notificări.
Jurisprudență și comentarii disponibile în Ortexo Pro.
Paragraf
*) Textul iniţial a fost publicat în MONITORUL OFICIAL nr. 213 din 8 martie 2006. Aceasta este forma actualizată de S.C. "Centrul Teritorial de Calcul Electronic" S.A. până la data de 23 februarie 2010, cu modificările şi completările aduse de ORDINUL nr. 43 din 22 februarie 2007; ORDINUL nr. 7 din 12 februarie 2010.
CAPITOL
Capitolul I Dispoziţii generale
ART
Articolul 1
Paragraf
Prezenta normă sanitară veterinară stabileşte condiţiile de sănătate a animalelor pentru mişcarea ecvideelor vii între statele membre ale Uniunii Europene şi importul acestora din ţări terţe.
Paragraf
Art. 1 a fost modificat de pct. 1 al art. II din ORDINUL nr. 43 din 22 februarie 2007, publicat în MONITORUL OFICIAL nr. 155 din 5 martie 2007.
ART
Articolul 2
Paragraf
În scopurile prezentei norme sanitare veterinare, se utilizează următoarele definiţii:
litera a)
exploataţie - unitate agricolă sau de antrenament, grajd ori, în general, orice incinte sau amenajări în care sunt ţinute ori crescute în mod obişnuit ecvideele, indiferent de utilizare;
litera b)
ecvidee - animale sălbatice sau domestice din specia ecvine (incluzând zebrele) sau asinii ori descendenţii încrucişărilor acestor specii;
litera c)
ecvidee înregistrate - orice ecvidee înregistrate, aşa cum sunt definite în Normele privind organizarea stud-book-ului, certificarea originii şi comerţul cu ecvidee de rasă pură, aprobate prinOrdinul ministrului agriculturii, pădurilor şi dezvoltării rurale nr. 464/2006, publicat în Monitorul Oficial al României, Partea I, nr. 715 din 21 august 2006, ce transpune în legislaţia naţională Directiva Consiliului 90/427/CEE, identificate prin intermediul unui document de identificare, emis de autoritatea de creştere sau orice altă autoritate competentă a ţării de origine a animalului, care administrează cartea genealogică ori registrul pentru acea rasă de animale, sau orice asociaţie ori organizaţie internaţională ce se ocupă de cai pentru competiţie sau curse;
Paragraf
Lit. c) a alin. 2 a fost modificată de pct. 2 al art. II din ORDINUL nr. 43 din 22 februarie 2007, publicat în MONITORUL OFICIAL nr. 155 din 5 martie 2007.
litera d)
ecvidee pentru tăiere - ecvidee destinate a fi transportate la abator pentru tăiere, fie direct, fie după tranzitul printr-o piaţă sau un centru autorizat de colectare;
litera e)
ecvidee pentru reproducţie şi producţie - alte ecvidee decât cele menţionate la lit. c) şi d) ale prezentului articol;
litera f)
stat membru sau ţară terţă liberă de pestă ecvină - orice stat membru sau ţară terţă în care nu s-a detectat nici o evidenţă clinică, serologică (la ecvideele nevaccinate) ori epidemiologică de pestă ecvină pe teritoriul în cauză în ultimii 2 ani şi în care nu s-au efectuat vaccinări împotriva bolii în ultimile 12 luni;
litera g)
boli cu notificare obligatorie - bolile enumerate în anexa nr. 1;
litera h)
medic veterinar oficial - medicul veterinar desemnat de autoritatea veterinară centrală a unui stat membru sau a unei ţări terţe;
litera i)
admitere temporară - statutul unui animal înregistrat, care este originar într-o ţară terţă şi este admis pe teritoriul Comunităţii Europene pentru o perioadă mai mică de 90 de zile, ce va fi stabilită de Comisia Europeană în funcţie de situaţia sănătăţii animalelor din ţara de origine.
CAPITOL
Capitolul II Reguli pentru mişcarea ecvideelor
ART
Articolul 3
litera
(1) Autoritatea veterinară centrală a României trebuie să autorizeze mişcarea ecvideelor înregistrate pe teritoriul său sau să trimită ecvidee către un alt stat membru doar dacă ele satisfac condiţiile stabilite de art. 4 şi 5.
litera
(2) Totuşi, autoritatea veterinară centrală a României ca stat de destinaţie poate acorda derogări generale sau limitate cu privire la transportul de ecvidee, care:
litera a)
sunt conduse călare sau dirijate, în scopuri sportive ori recreative, pe drumuri situate lângă frontierele cu Republica Ungară şi Republica Bulgaria;
litera b)
iau parte la evenimentele culturale sau similare acestora ori la activităţi organizate de organismele locale autorizate, evenimente situate lângă frontierele cu Republica Ungară şi Republica Bulgaria;
litera c)
sunt destinate numai păşunatului sau muncii temporare lângă frontierele cu Republica Ungară şi Republica Bulgaria.
Paragraf
Alin. (2) al art. 3 a fost modificat de pct. 3 al art. II din ORDINUL nr. 43 din 22 februarie 2007, publicat în MONITORUL OFICIAL nr. 155 din 5 martie 2007.
litera
(3) Dacă autoritatea veterinară centrală a României face uz de această autorizare, ea trebuie să informeze Comisia Europeană asupra conţinutului derogărilor acordate.
ART
Articolul 4
litera
(1) Ecvideele nu trebuie să prezinte nici un semn clinic de boală la inspecţie. Inspecţia trebuie să fie efectuată cu 48 de ore înainte de îmbarcarea sau încărcarea lor. În cazul ecvideelor înregistrate, această inspecţie va fi totuşi solicitată numai pentru comerţul intracomunitar, fără să se prejudicieze prevederile art. 6.
litera
(2) Fără a prejudicia cerinţele alin. (5), referitoare la bolile cu notificare obligatorie, medicul veterinar oficial trebuie, în momentul inspecţiei, să fie convins de faptul că nu există motive - în special pe baza declaraţiilor proprietarului sau crescătorului - pentru a concluziona că ecvideele au venit în contact cu alte ecvidee care suferă de o boală infecţioasă sau contagioasă, în decursul celor 15 zile dinaintea inspecţiei.
litera
(3) Ecvideele nu trebuie să fie destinate tăierii în baza unui program naţional de eradicare a unei boli contagioase sau infecţioase.
litera
4) Ecvideele trebuie să fie identificate astfel:
Paragraf
(i) în cazul cailor înregistraţi, prin intermediul unui document de identificare prevăzut de normele aprobate prin Ordinul ministrului agriculturii, pădurilor şi dezvoltării rurale nr. 464/2006 ce transpune în legislaţia naţională Directiva Consiliului 90/427/CEE, care trebuie să certifice în special că au fost respectate prevederile alin. (5) şi (6) şi ale art. 5 din prezenta normă sanitară veterinară. Validitatea acestui document trebuie să fie suspendată de către medicul veterinar oficial pe durata interdicţiilor prevăzute la alin. (5) sau la art. 5. După tăierea cailor înregistraţi, documentul trebuie înapoiat autorităţii care l-a emis. Procedura pentru implementarea acestui punct va fi adoptată de către Comisia Europeană în conformitate cu procedura comunitară;
Paragraf
(îi) în cazul ecvideelor pentru reproducţie şi producţie, printr-o metodă de identificare ce va fi stabilită de Comisia Europeană, în conformitate cu procedura comunitară.
Paragraf
Până la utilizarea acestei metode, rămân aplicabile metodele de identificare naţionale aprobate oficial, cu condiţia ca acestea să fie notificate Comisiei Europene şi celorlalte state membre ale Uniunii Europene.
Paragraf
Alin. (4) al art. 4 a fost modificat de pct. 4 al art. II din ORDINUL nr. 43 din 22 februarie 2007, publicat în MONITORUL OFICIAL nr. 155 din 5 martie 2007.
litera
(5) În plus faţă de cerinţele stabilite de art. 5, ecvideele nu trebuie să provină dintr-o exploataţie care a fost supusă uneia dintre următoarele dispoziţii de interdicţie:
litera a)
dacă nu au fost tăiate toate animalele din speciile sensibile la boală situate în exploataţie, perioada de interdicţie cu privire la exploataţia de origine trebuie să fie de cel puţin:
Paragraf
- 6 luni în cazul ecvideelor suspecte de a fi contractat durină, începând cu data ultimului contact efectiv sau posibil cu un animal bolnav. Totuşi, în cazul unui armăsar, interdicţia se va aplica până când animalul va fi castrat;
Paragraf
- 6 luni în cazul morvei sau encefalomielitei ecvidee, începând din ziua în care sunt tăiate ecvideele care suferă de boala în cauză;
Paragraf
- în cazul anemiei infecţioase, până la data la care, după ce animalele infectate au fost tăiate, animalele care au rămas au prezentat reacţie negativă la două teste Coggins efectuate la un interval de 3 luni;
Paragraf
- 6 luni în cazul stomatitei veziculoase;
Paragraf
- o lună de la ultimul caz înregistrat, în cazul rabiei;
Paragraf
- 15 zile de la ultimul caz înregistrat, în cazul antraxului;
litera b)
dacă toate animalele din speciile sensibile la boală, existente în exploataţie, au fost tăiate, iar incintele au fost dezinfectate, perioada de interdicţie va fi de 30 de zile începând cu ziua în care animalele au fost distruse şi incintele dezinfectate, cu excepţia antraxului, când perioada de interdicţie este de 15 zile.
Paragraf
Autoritatea veterinară centrală a României poate acorda derogări de la aceste măsuri de interdicţie pentru hipodromuri şi piste de curse şi va informa Comisia Europeană referitor la natura oricăror derogări acordate.
litera
(6) Dacă autoritatea veterinară centrală a României întocmeşte sau a întocmit un program de combatere voluntară sau obligatorie pentru o boală la care ecvideele sunt sensibile, aceasta poate prezenta programul Comisiei Europene, în termen de 6 luni de la notificarea prezentei norme sanitare veterinare, subliniind în special:
Paragraf
- distribuţia bolii pe teritoriul său;
Paragraf
- motivele programului, luând în consideraţie importanţa bolii şi avantajele sale cost/beneficiu;
Paragraf
- zona geografică în care va fi implementat programul;
Paragraf
- categoriile de statut care vor fi aplicate unităţilor, standardele ce trebuie atinse pentru fiecare specie şi procedurile de testare ce vor fi utilizate;
Paragraf
- procedurile de monitorizare a programului;
Paragraf
- acţiunea care va fi întreprinsă în cazul în care, dintr-un motiv oarecare, o exploataţie îşi pierde statutul;
Paragraf
- măsurile ce vor fi luate dacă rezultatele testelor efectuate în concordanţă cu prevederile programului sunt pozitive;
Paragraf
- natura nediscriminatorie a comerţului pe teritoriul respectiv cu privire la comerţul intracomunitar.
Paragraf
Alin. (7) al art. 4 a fost abrogat de pct. 5 al art. II din ORDINUL nr. 43 din 22 februarie 2007, publicat în MONITORUL OFICIAL nr. 155 din 5 martie 2007.
litera
(8) Programele prezentate de autoritatea veterinară centrală a României sunt examinate de Comisia Europeană, care le aprobă în conformitate cu procedura comunitară. Orice garanţii suplimentare, generale sau specifice, care pot fi solicitate în comerţul intracomunitar, pot fi definite în conformitate cu aceeaşi procedură. Astfel de garanţii nu trebuie să le depăşească pe cele solicitate de România pe teritoriul său.
Paragraf
Alin. (8) al art. 4 a fost modificat de pct. 6 al art. II din ORDINUL nr. 43 din 22 februarie 2007, publicat în MONITORUL OFICIAL nr. 155 din 5 martie 2007.
litera
(9) Programele prezentate de autoritatea veterinară centrală a României pot fi modificate sau completate în conformitate cu procedura comunitară. Modificările ori completările programelor care au fost deja aprobate sau garanţiilor la care se referă alin. (8) pot fi aprobate în conformitate cu aceeaşi procedură.
Paragraf
Alin. (9) al art. 4 a fost modificat de pct. 7 al art. II din ORDINUL nr. 43 din 22 februarie 2007, publicat în MONITORUL OFICIAL nr. 155 din 5 martie 2007.
ART
Articolul 5
litera
(1) Se pot expedia ecvidee din acea parte a teritoriului care este considerată a fi infectată cu pestă ecvină, în sensul alin. (2), doar în condiţiile stabilite la alin. (3).
Paragraf
Alin. (1) al art. 5 a fost modificat de pct. 8 al art. II din ORDINUL nr. 43 din 22 februarie 2007, publicat în MONITORUL OFICIAL nr. 155 din 5 martie 2007.
litera a)
Se consideră infectată cu pestă ecvină o parte a teritoriului în care:
Paragraf
(i) o evidenţă clinică, serologică (la animalele nevaccinate) şi/sau epidemiologică a relevat prezenţa pestei ecvine în ultimii 2 ani; sau
Paragraf
(îi) s-a efectuat vaccinarea împotriva pestei ecvine în ultimele 12 luni.
Paragraf
Lit. a) a alin. (2) al art. 5 a fost modificată de pct. 9 al art. II din ORDINUL nr. 43 din 22 februarie 2007, publicat în MONITORUL OFICIAL nr. 155 din 5 martie 2007.
litera b)
Partea teritoriului considerată a fi infectată cu pesta ecvină trebuie să cuprindă minimum:
Paragraf
(i) o zonă de protecţie cu o rază de cel puţin 100 km în jurul oricărui centru de infecţie;
Paragraf
(îi) o zonă de supraveghere de cel puţin 50 km care se extinde dincolo de zona de protecţie, în care nu s-a efectuat nicio vaccinare în ultimele 12 luni.
Paragraf
Lit. b) a alin. (2) al art. 5 a fost modificată de pct. 9 al art. II din ORDINUL nr. 43 din 22 februarie 2007, publicat în MONITORUL OFICIAL nr. 155 din 5 martie 2007.
litera c)
Regulile care controlează măsurile de combatere referitoare la teritoriile şi zonele menţionate la lit. a) şi b) şi derogările relevante sunt specificate în Norma sanitară veterinară privind măsurile de control şi combatere a pestei africane a calului, aprobată prinOrdinul preşedintelui Autorităţii Naţionale Sanitare Veterinare şi pentru Siguranţa Alimentelor nr. 135/2006, publicat în Monitorul Oficial al României, Partea I, nr. 617 din 18 iulie 2006, ce transpune în legislaţia naţională Directiva Consiliului 92/35/CEE.
Paragraf
Lit. c) a alin. (2) al art. 5 a fost modificată de pct. 9 al art. II din ORDINUL nr. 43 din 22 februarie 2007, publicat în MONITORUL OFICIAL nr. 155 din 5 martie 2007.
litera d)
Toate ecvideele vaccinate care se găsesc în zona de protecţie trebuie să fie înregistrate şi identificate în conformitate cu art. 6 alin. (1) din norma sanitară veterinară aprobată prinOrdinul preşedintelui Autorităţii Naţionale Sanitare Veterinare şi pentru Siguranţa Alimentelor nr. 135/2006ce transpune în legislaţia naţională Directiva Consiliului 92/35/CEE. Documentul de identificare şi/sau certificatul de sănătate trebuie să poarte o menţiune clară referitoare la această vaccinare.
Paragraf
Lit. d) a alin. (2) al art. 5 a fost modificată de pct. 9 al art. II din ORDINUL nr. 43 din 22 februarie 2007, publicat în MONITORUL OFICIAL nr. 155 din 5 martie 2007.
litera
(3) România poate expedia din teritoriul menţionat la alin. (2) lit. b) doar ecvidee care îndeplinesc următoarele cerinţe:
litera a)
să fie expediate doar în anumite perioade ale anului ce vor fi stabilite de Comisia Europeană asistată de Comitetul Permanent privind Lanţul Alimentar şi Sănătatea Animalelor, în funcţie de activitatea insectelor vectori;
Paragraf
Lit. a) a alin. (3) al art. 5 a fost modificată de pct. 10 al art. II din ORDINUL nr. 43 din 22 februarie 2007, publicat în MONITORUL OFICIAL nr. 155 din 5 martie 2007.
litera b)
nu trebuie să prezinte nici un simptom clinic de pestă ecvină în ziua inspecţiei menţionate la art. 4 alin. (1);
litera c)
dacă nu au fost vaccinate împotriva pestei ecvine, trebuie să fi fost supuse şi să fi reacţionat negativ la un test de fixare a complementului pentru pesta ecvină descris în anexa nr. 4, în două rânduri, la un interval de 21-30 de zile între cele două teste, dintre care cel de-al doilea trebuie să fi fost efectuat în cursul a 10 zile înainte de expediere; dacă au fost vaccinate împotriva pestei ecvine, trebuie să nu fi fost vaccinate în ultimele două luni şi trebuie să fi fost supuse testului de fixare descris în anexa nr. 4, la intervalele menţionate mai sus, fără să se fi înregistrat o creştere a titrului de anticorpi;
litera d)
trebuie să fi fost ţinute într-o staţiune de carantină pentru o perioadă minimă de 40 de zile înainte de expediere;
litera e)
trebuie să fi fost protejate împotriva insectelor vectori pe perioada carantinei şi în cursul transportului de la staţia de carantină la locul de expediere.
ART
Articolul 6
litera
(1) Dacă România şi alte state membre implementează un sistem de control alternativ ce asigură garanţii echivalente celor stabilite la art. 4 alin. (5), în ceea ce priveşte transportul pe teritoriul lor al ecvideelor şi al ecvideelor înregistrate, în special prin intermediul unui document de identificare, îşi pot garanta reciproc derogări de la prevederile art. 4 alin. (1) şi ale art. 8 alin. (1) lit. b).
litera
(2) Părţile vor informa Comisia Europeană despre aceasta.
ART
Articolul 7
litera
(1) Ecvideele trebuie să fie transportate, cât mai curând posibil, de la exploataţia de origine la locul de destinaţie, fie direct, fie printr-o piaţă sau printr-un centru de colectare aprobat, astfel definite ca «centru de colectare» conform art. 2 alin. (2) lit. o) din Norma sanitară veterinară privind problemele de sănătate a animalelor ce afectează comerţul intracomunitar cu animale din speciile bovine şi suine, aprobată prin Ordinul preşedintelui Autorităţii Naţionale Sanitare Veterinare şi pentru Siguranţa Alimentelor nr. 61/2006, publicat în Monitorul Oficial al României, Partea I, nr. 289 şi 289 bis din 30 martie 2006, cu modificările şi completările ulterioare, ce transpune Directiva Consiliului 64/432/CEE, în vehicule sau containere care au fost curăţate şi dezinfectate periodic, la intervale care sunt stabilite de statul membru al Uniunii Europene de expediere.
Paragraf
Alin. (1) al art. 7 a fost modificat de pct. 2 al art. IV din ORDINUL nr. 7 din 12 februarie 2010, publicat în MONITORUL OFICIAL nr. 119 din 23 februarie 2010.
litera
(2) Vehiculele trebuie să fie proiectate astfel încât dejecţiile, aşternuturile de paie sau furajele să nu poată cădea din vehicul în timpul transportului. Transportul trebuie efectuat astfel încât sănătatea şi bunăstarea ecvideelor să fie protejate eficient.
Paragraf
Alin. (2) al art. 7 a fost modificat de pct. 2 al art. IV din ORDINUL nr. 7 din 12 februarie 2010, publicat în MONITORUL OFICIAL nr. 119 din 23 februarie 2010.
litera
(3) Autoritatea veterinară centrală a României ca ţară de destinaţie poate acorda, în mod general sau limitat, o derogare de la unele cerinţe ale art. 4 alin. (5) pentru orice animal care poartă o marcă specială care indică faptul că este destinat tăierii, cu condiţia ca certificatul de sănătate să menţioneze o astfel de derogare.
litera
(4) În cazul acordării acestei derogări, ecvideele pentru tăiere trebuie să fie transportate direct la abatorul desemnat şi să fie tăiate în termen de 5 zile de la sosirea la abator.
litera
(5) Medicul veterinar oficial trebuie să înregistreze numărul de identificare sau numărul documentului de identificare al animalului tăiat şi să trimită autorităţii competente de la locul de expediere, la cererea acesteia din urmă, o atestare a faptului că animalul a fost tăiat.
ART
Articolul 8
litera
(1) Autoritatea veterinară centrală a României trebuie să se asigure că:
litera a)
ecvideele înregistrate, care părăsesc exploataţiile de pe teritoriul său, sunt însoţite de documentul de identificare stabilit la art. 4 alin. (4), împreună cu - dacă sunt destinate comerţului intracomunitar - atestarea prevăzută în anexa nr. 2;
litera b)
ecvideele pentru reproducţie, producţie şi tăiere sunt însoţite, în cursul transportului, de un certificat de sănătate care respectă prevederile anexei nr. 3.
litera
(2) Certificatul sau, în cazul unui document de identificare, formularul ce conţine particularităţile de sănătate ale animalului trebuie să fie întocmit, fără a prejudicia prevederile art. 6, în decursul celor 48 de ore anterioare îmbarcării lui sau nu mai târziu de ultima zi lucrătoare anterioară îmbarcării, în cel puţin una dintre limbile oficiale ale statelor membre de expediere şi de destinaţie. Durata valabilităţii certificatului este de 10 zile. Certificatul trebuie să fie constituit dintr-o singură filă.
litera
(3) Importul de ecvidee, altele decât ecvideele înregistrate, poate fi însoţit de un singur certificat de sănătate pe lot în loc de certificatul individual menţionat la alin. (1) lit. b).
ART
Articolul 9
Paragraf
Regulile stabilite în Norma sanitară veterinară privind controalele veterinare şi zootehnice aplicabile comerţului României cu statele membre ale Uniunii Europene cu unele animale vii şi produse de origine animală, aprobată prin Ordinul ministrului agriculturii, alimentaţiei şi pădurilor nr. 580/2002, publicat în Monitorul Oficial al României, Partea I, nr. 250 din 11 aprilie 2003, ce transpune în legislaţia naţională Directiva Consiliului 90/425/CEE, se aplică în special controalelor la origine, organizării şi urmăririi controalelor ce vor fi efectuate de statul membru de destinaţie şi măsurilor de protecţie care trebuie să fie implementate.
ART
Articolul 10
litera
(1) Experţii veterinari ai Comisiei Europene, în cooperare cu autoritatea veterinară centrală a României, pot organiza inspecţii ad-hoc în România, pentru a se asigura de aplicarea uniformă a prevederilor prezentei norme sanitare veterinare. Comisia Europeană va informa autoritatea veterinară centrală a României despre rezultatele acestor inspecţii.
litera
(2) Autoritatea veterinară competentă centrală a României, ca ţară pe al cărei teritoriu va fi efectuată inspecţia, va asigura experţilor tot sprijinul necesar pentru a-şi îndeplini sarcinile.
CAPITOL
Capitolul III Reguli pentru importul din ţări terţe
ART
Articolul 11
litera
(1) Ecvideele importate în România trebuie să respecte condiţiile stabilite la art. 12, 13, 14, 15 şi 16.
Paragraf
Alin. (1) al art. 11 a fost modificat de pct. 12 al art. II din ORDINUL nr. 43 din 22 februarie 2007, publicat în MONITORUL OFICIAL nr. 155 din 5 martie 2007.
litera
(2) Până la data intrării în vigoare a deciziilor adoptate conform art. 12, 13, 14, 15 şi 16, România va aplica importului de ecvidee din ţări terţe condiţii cel puţin echivalente celor care rezultă din aplicarea cap. II al prezentei norme sanitare veterinare.
ART
Articolul 12
litera
(1) Importul ecvideelor în România este autorizat doar din ţări terţe care figurează pe o listă ce va fi întocmită sau modificată de Comisia Europeană.
Paragraf
Alin. (1) al art. 12 a fost modificat de pct. 13 al art. II din ORDINUL nr. 43 din 22 februarie 2007, publicat în MONITORUL OFICIAL nr. 155 din 5 martie 2007.
litera
(2) Luând în consideraţie situaţia de sănătate şi garanţiile prevăzute de ţările terţe pentru ecvidee, poate fi decis, în conformitate cu procedura comunitară, ca autorizarea prevăzută de prezentul alineat să se aplice pentru întreg teritoriul ţării terţe sau numai unei părţi a teritoriului său.
litera
(3) În acest scop şi pe baza standardelor internaţionale relevante, se va ţine cont de modul în care ţara terţă aplică şi implementează respectivele standarde, în special principiul regionalizării în cadrul teritoriului său, şi în ceea ce priveşte cerinţele sanitare pe care le aplică importului din alte ţări terţe sau din Comunitatea Europeană.
litera
(4) Când se întocmeşte sau se modifică lista prevăzută la alin. (1) se va ţine cont de:
litera a)
statutul de sănătate al ecvideelor, al altor animale domestice şi sălbatice din ţara terţă, în particular privind bolile animalelor exotice sau orice aspecte legate de sănătatea generală şi de mediu din ţara terţă, care ar presupune un risc pentru statutul Comunităţii Europene privind sănătatea sau mediul;
litera b)
legislaţia ţării terţe referitoare la sănătatea şi bunăstarea animalelor;
litera c)
organizarea autorităţii veterinare competente şi a serviciilor sale de inspecţie, prerogativele acestor servicii, supravegherea care se aplică acestora şi mijloacele de care dispun, inclusiv capacitatea personalului şi a laboratoarelor, pentru a aplica legislaţia naţională în mod eficient;
litera d)
asigurările pe care autoritatea competentă veterinară a ţării terţe le poate da privind concordanţa sau echivalenţa cu condiţiile de sănătate animală din Comunitatea Europeană;
litera e)
dacă ţara terţă este membră a Oficiului Internaţional al Epizootiilor (OIE) şi dacă furnizează cu regularitate şi rapiditate informaţii privind existenţa bolilor infecţioase sau contagioase ale ecvideelor pe teritoriul său, în particular acele boli catalogate de OIE şi prevăzute în anexa nr. 1;
litera f)
garanţiile oferite de ţara terţă de a informa direct Comisia Europeană şi statele membre:
Paragraf
(i) în decurs de 24 de ore de la confirmarea apariţiei bolii infecţioase a ecvideelor, prevăzută în anexa nr. 1, sau a oricărei schimbări în programul de vaccinare referitor la astfel de boli;
Paragraf
(îi) în cel mai scurt timp de la orice schimbare propusă în regulile sanitare naţionale referitoare la ecvidee, în particular cele privind importul de ecvidee;
Paragraf
(iii) la intervale regulate, despre statusul de sănătate din teritoriu privind ecvideele;
litera g)
toată experienţa importurilor anterioare de ecvidee în viaţă din ţări terţe şi de rezultatele oricăror controale efectuate la import;
litera h)
rezultatele inspecţiilor şi/sau auditului comunitar efectuate în ţara terţă, în particular de rezultatele evaluărilor autorităţilor competente sau, unde Comisia Europeană cere astfel, raportul emis de autorităţile competente privind inspecţiile pe care acestea le-au efectuat;
litera i)
regulile privind prevenirea şi controlul bolilor infecţioase sau contagioase ale animalelor, în vigoare în ţara terţă, şi implementarea acestora, inclusiv regulile privind importul de ecvidee din alte ţări terţe.
litera
(5) Comisia Europeană va pune la dispoziţie publicului toate listele actualizate, întocmite şi modificate potrivit prevederilor alin. (1).
litera
(6) Aceste liste pot fi combinate cu alte liste întocmite în scopul sănătăţii animalelor şi al celei publice şi pot, de asemenea, să includă modele de certificate de sănătate.
litera
(7) Condiţiile speciale de import pentru fiecare ţară terţă sau grup de ţări terţe, referitor la situaţia de sănătate animală a ecvideelor în ţara sau în ţările respective, trebuie stabilite în conformitate cu procedura comunitară.
Paragraf
Alin. (8) al art. 12 a fost abrogat de pct. 14 al art. II din ORDINUL nr. 43 din 22 februarie 2007, publicat în MONITORUL OFICIAL nr. 155 din 5 martie 2007.
ART
Articolul 13
litera
(1) Ecvideele trebuie să provină din ţări terţe:
litera a)
indemne de pestă ecvină;
litera b)
care au fost indemne pentru 2 ani de encefalomielită ecvină venezueleană (EEV);
litera c)
care au fost indemne timp de 6 luni de durină şi morvă.
Paragraf
Alin. (2) al art. 13 a fost abrogat de pct. 15 al art. II din ORDINUL nr. 43 din 22 februarie 2007, publicat în MONITORUL OFICIAL nr. 155 din 5 martie 2007.
ART
Articolul 14
Paragraf
Înainte de ziua încărcării pentru transportarea către statul membru de destinaţie, ecvideele trebuie să fi rămas fără întrerupere pe teritoriul sau într-o parte a teritoriului unei ţări terţe ori, în cazul regionalizării în partea teritoriului definit de Comisia Europeană, pentru o perioadă ce va fi determinată în deciziile care vor fi adoptate conform art. 15. Ele trebuie să provină dintr-o exploataţie aflată sub supraveghere veterinară.
Paragraf
Art. 14 a fost modificat de pct. 16 al art. II din ORDINUL nr. 43 din 22 februarie 2007, publicat în MONITORUL OFICIAL nr. 155 din 5 martie 2007.
ART
Articolul 15
litera
(1) Importul ecvideelor de pe teritoriul unei ţări terţe sau o parte a acestuia definit de Comisia Europeană, care figurează pe lista întocmită în conformitate cu art. 12 alin. (1), trebuie autorizat numai dacă ecvideele, pe lângă cerinţele art. 13:
litera a)
respectă cerinţele de sănătate a animalelor pentru importul de ecvidee din ţara respectivă, adoptate în conformitate cu procedura comunitară, cu referire la specia respectivă şi la categoriile de ecvidee.
Paragraf
Baza de referinţă pentru stabilirea condiţiilor de sănătate a animalelor în conformitate cu prezentul alineat o constituie standardele stabilite la art. 4 şi 5;
litera b)
în cazul unei ţări terţe care nu este liberă de stomatita veziculoasă sau de arterita virală de cel puţin 6 luni, ecvideele trebuie să respecte următoarele cerinţe:
Paragraf
(i) trebuie să provină dintr-o exploataţie care a fost indemnă de stomatita veziculoasă de cel puţin 6 luni şi trebuie să fi reacţionat negativ la un test serologic înainte de a fi expediate;
Paragraf
(îi) în cazul arteritei virale, ecvideele masculi trebuie, fără a se aduce atingere prevederilor stabilite de Comisia Europeană privind condiţiile speciale pentru admiterea temporară pe teritoriul comunitar a ecvideelor înregistrate sau a ecvideelor destinate utilizărilor speciale ori reintroducerea acestora pe teritoriul comunitar după ce au fost exportate temporar, să fi reacţionat negativ la un test serologic, la un test de izolare a virusului sau la orice alt test recunoscut care să garanteze că animalul este indemn de această boală.
Paragraf
Alin. (1) al art. 15 a fost modificat de pct. 17 al art. II din ORDINUL nr. 43 din 22 februarie 2007, publicat în MONITORUL OFICIAL nr. 155 din 5 martie 2007.
Paragraf
Alin. (2) al art. 15 a fost abrogat de pct. 18 al art. II din ORDINUL nr. 43 din 22 februarie 2007, publicat în MONITORUL OFICIAL nr. 155 din 5 martie 2007.
ART
Articolul 16
litera
(1) Ecvideele trebuie identificate în conformitate cu art. 4 alin. (4) şi însoţite de un certificat întocmit de un medic veterinar oficial din ţara terţă exportatoare. Acest certificat trebuie:
litera a)
să fie emis în ziua încărcării animalelor pentru expediere către statul membru de destinaţie sau, în cazul cailor înregistraţi, în ultima zi lucrătoare dinaintea îmbarcării;
litera b)
să fie întocmit în cel puţin una dintre limbile oficiale ale statelor membre de destinaţie şi în una dintre limbile oficiale ale statului membru în care se efectuează inspecţia de import;
litera c)
să fie în original;
litera d)
să ateste că animalele satisfac cerinţele prezentei norme sanitare veterinare şi cele stabilite conform prezentei norme sanitare veterinare cu privire la importul din ţări terţe;
litera e)
să fie constituit dintr-o singură filă;
litera f)
să fie redactat pentru un singur destinatar sau, în cazul animalelor pentru tăiere, pentru un singur transport, cu condiţia ca animalele să fie marcate şi identificate corespunzător.
Paragraf
Autoritatea veterinară competentă centrală a României va informa Comisia Europeană dacă va face uz de această opţiune.
litera
(2) Certificatul trebuie să fie redactat într-o formă care să fie conformă cu modelul stabilit în conformitate cu procedura comunitară.
ART
Articolul 17
litera
(1) Vor fi efectuate controale ad-hoc de experţii veterinari ai statelor membre şi ai Comisiei Europene pentru a verifica dacă prevederile prezentei norme sanitare veterinare, în special cele ale art. 12 alin. (2), sunt puse în aplicare.
litera
(2) Dacă aceste controale efectuate în temeiul prezentului articol evidenţiază fapte grave ca cele la adresa unei exploataţii aprobate, Comisia Europeană va informa fără întârziere statele membre şi, în continuare, va adopta o decizie care să suspende temporar autorizarea.
litera
(3) Experţii statelor membre care vor fi însărcinaţi cu aceste controale vor fi numiţi de către Comisia Europeană ca urmare a unei propuneri din partea statelor membre.
litera
(4) Aceste controale se vor efectua în numele Uniunii Europene, care va suporta costul pentru cheltuielile implicate de acestea.
ART
Articolul 18
litera
(1) Imediat după sosirea în România, ca ţară de destinaţie, ecvideele pentru tăiere trebuie duse la un abator fie direct, fie după tranzitul printr-o piaţă ori un centru de colectare şi, în concordanţă cu cerinţele de sănătate a animalelor, trebuie tăiate într-o perioadă de timp specificată în deciziile ce vor fi adoptate conform art. 15.
litera
(2) Fără a aduce atingere oricăror condiţii speciale ce pot fi adoptate în conformitate cu procedura comunitară, autoritatea veterinară centrală a României poate, din motive de sănătate a animalelor, să desemneze abatorul la care trebuie duse aceste ecvidee.
ART
Articolul 19
Paragraf
Autoritatea Naţională Sanitară Veterinară şi pentru Siguranţa Alimentelor informează Comisia Europeană cu privire la actele normative şi prevederile administrative necesare pentru implementarea prezentei norme sanitare veterinare.
Paragraf
Art. 19 a fost modificat de pct. 19 al art. II din ORDINUL nr. 43 din 22 februarie 2007, publicat în MONITORUL OFICIAL nr. 155 din 5 martie 2007.
CAPITOL
Capitolul IV Prevederi finale
ART
Articolul 20
Paragraf
Anexele nr. 1-4 fac parte integrantă din prezenta normă sanitară veterinară.
ANX
Anexa 1
Paragraf
la norma sanitară veterinară
Paragraf
BOLI CU NOTIFICARE OBLIGATORIE
Paragraf
Următoarele boli trebuie notificate obligatoriu:
Paragraf
- durină;
Paragraf
- morvă;
Paragraf
- encefalomielită ecvină (de toate tipurile, inclusiv EEV);
Paragraf
- anemie infecţioasă;
Paragraf
- rabie;
Paragraf
- antrax;
Paragraf
- pestă ecvină;
Paragraf
- stomatită veziculoasă.
ANX
Anexa 2
Paragraf
la norma sanitară veterinară
Paragraf
INFORMAŢII DE SĂNĂTATE (^a)
Paragraf
Nr. paşaportului .............................................
Paragraf
Subsemnatul certific (^b) că animalul din specia ecvidee descris mai sus îndeplineşte următoarele cerinţe:
litera a)
a fost examinat astăzi şi nu prezintă niciun semn clinic de boală;
litera b)
nu este destinat tăierii în condiţiile unui program naţional de eradicare a unei boli infecţioase sau contagioase;
litera c)
nu provine dintr-un teritoriu sau parte a teritoriului unui stat membru ori ţări terţe supuse unor restricţii din cauza pestei ecvine; sau
Paragraf
- provine dintr-un teritoriu sau parte a teritoriului unui stat membru care a fost supus interdicţiei din motive de sănătate a animalelor şi a fost supus, cu rezultate satisfăcătoare, testelor prevăzute la art. 5 alin. (3) din Directiva 90/426/CEE, în staţia de carantină a ................ între ................................. şi ............................... (^c);
Paragraf
- nu este vaccinat împotriva pestei ecvine sau a fost vaccinat împotriva pestei ecvine la ..................... (^c) (^d);
litera d)
nu provine dintr-o exploataţie care a fost supusă interdicţiei din motive de sănătate a animalelor şi nici nu a avut contact cu ecvidee provenite dintr-o exploataţie care a fost supusă interdicţiei din motive de sănătate animală:
Paragraf
- timp de 6 luni în cazul ecvideelor suspecte de a fi contractat durina, începând cu data ultimului contact efectiv sau posibil cu un animal bolnav. Totuşi, în cazul unui armăsar, interdicţia se va aplica până când animalul este castrat;
Paragraf
- timp de 6 luni în cazul morvei sau encefalomielitei ecvine, începând cu ziua în care ecvideele ce suferă de boala în cauză sunt tăiate;
Paragraf
- în cazul anemiei infecţioase până la data la care animalele infectate au fost tăiate, iar cele rămase au prezentat reacţie negativă la cele două teste Coggins efectuate la interval de 3 luni;
Paragraf
- timp de 6 luni de la ultimul caz, în cazul stomatitei veziculoase;
Paragraf
- timp de o lună de la ultimul caz, în cazul rabiei;
Paragraf
- timp de 15 zile de la ultimul caz, în cazul antraxului;
Paragraf
- dacă toate animalele din speciile sensibile la boală situate în exploataţie au fost tăiate, iar incinta a fost dezinfectată în cursul a 30 de zile, începând cu ziua în care animalele au fost distruse şi incinta a fost dezinfectată, exceptând cazul antraxului, când perioada de interdicţie este de 15 zile;
litera e)
din cunoştinţele mele, nu a venit în contact cu ecvidee care suferă de o boală infecţioasă sau contagioasă, în cele 15 zile precedente acestei declaraţii;
litera f)
în momentul inspecţiei a fost corespunzător pentru a fi transportat pe traseul stabilit în conformitate cu prevederile Directivei Consiliului 91/628/CEE(^e);
PRE PRE_566
[Text Preformatat S_PRE ID: N/A]
Linie PRE 1
Data
Linie PRE 2
Locul
Linie PRE 3
Ştampila şi semnătura medicului veterinar oficial *1)
Linie PRE 4
*1) Numele cu majuscule şi funcţia
Paragraf
(^a) Această informaţie nu este solicitată atunci când există un acord bilateral în conformitate cu art. 6 din Directiva Consiliului 90/426/CEE.
Paragraf
(^b) Valid pentru 10 zile.
Paragraf
(^c) A se şterge orice nu se aplică.
Paragraf
(^d) Data vaccinării trebuie înscrisă pe paşaport.
Paragraf
(^e) Această declaraţie nu îi scuteşte pe transportatori de obligaţiile acestora în conformitate cu prevederile comunitare în vigoare ce se referă, în special, la starea animalelor care urmează să fie transportate.
Paragraf
Anexa 2 a fost modificată de pct. 20 al art. II din ORDINUL nr. 43 din 22 februarie 2007, publicat în MONITORUL OFICIAL nr. 155 din 5 martie 2007.
ANX
Anexa 3
Paragraf
la norma sanitară veterinară
Paragraf
MODEL
Paragraf
CERTIFICAT DE SĂNĂTATE
Paragraf
pentru comerţul dintre statele membre ale Uniunii Europene
Paragraf
ECVIDEE
Paragraf
Nr.: ....................
Paragraf
Statul membru de expediere: ...............................................
Paragraf
Ministerul responsabil: ...................................................
Paragraf
Departamentul teritorial responsabil: .....................................
Paragraf
I. Numărul de ecvidee: ....................................................
Paragraf
II. Identificarea ecvideelor: .............................................
PRE PRE_592
[Text Preformatat S_PRE ID: N/A]
Linie PRE 1
Numărul de ecvidee *1)
Linie PRE 2
Specia de cal, măgar, catâr, bardou
Linie PRE 3
Rasa, vârsta, sexul
Linie PRE 4
Metoda de identificare şi identificarea *2)
Linie PRE 5
*1) În cazul animalelor destinate tăierii, natura mărcii speciale. *2) Un paşaport destinat identificării ecvideelor poate fi ataşat la acest certificat cu condiţia ca numărul acestuia să fie declarat.
Paragraf
III. Originea şi destinaţia animalului/animalelor:
Paragraf
Animalul/animalele trebuie trimis/trimise
Paragraf
de la: ....................................................................
Paragraf
la: ......................................................................
Paragraf
Numele şi adresa expeditorului: ..........................................
Paragraf
Numele şi adresa destinatarului: .........................................
Paragraf
IV. Informaţii despre sănătate^(a)
Paragraf
Subsemnatul certific că animalul/animalele descris/descrise mai sus
Paragraf
îndeplineşte/îndeplinesc următoarele cerinţe:
Paragraf 1
a(au) fost examinat(e) astăzi şi nu a(u) prezentat niciun semn clinic
Paragraf
de boală;
Paragraf 2
nu este/sunt destinat(e) tăierii în baza unui program naţional de
Paragraf
eradicare a bolii contagioase sau infecţioase;
Paragraf 3
nu provin(e) din teritoriul ori partea teritoriului unui stat membru sau
Paragraf
a unei ţări terţe care este supusă restricţiilor din cauza pestei ecvine;
Paragraf
sau
Paragraf
- provin(e) din teritoriul sau partea teritoriului unui stat membru care a
Paragraf
fost supus restricţiilor din cauza pestei ecvine şi a(u) fost supus(e), cu
Paragraf
rezultate satisfăcătoare, testelor prevăzute la art. 5 alin. (3) din Directiva
Paragraf 90
/426/CEE, în staţia de carantină ...................... între .................
Paragraf
şi ................... ^(b);
Paragraf
- nu este/sunt vaccinat(e) împotriva pestei ecvine pe ................ ^(b);
Paragraf
sau
Paragraf
- a(u) fost vaccinat(e) împotriva pestei ecvine pe ................... ^(b);
Paragraf 4
nu provin(e) dintr-o exploataţie care a fost supusă interdicţiei din motive
Paragraf
de sănătate a animalelor şi nici nu a(u) avut contact cu ecvidee dintr-o
Paragraf
exploataţie care a fost supusă interdicţiei din motive de sănătate a animalelor:
Paragraf
- timp de 6 luni în cazul ecvideelor suspecte de a fi contractat durina,
Paragraf
începând cu data ultimului contact efectiv sau posibil cu un animal bolnav.
Paragraf
Totuşi, în cazul unui armăsar, interdicţia se va aplica până când animalul este
Paragraf
castrat;
Paragraf
- timp de 6 luni în caz de morvă sau encefalomielită ecvină, începând cu ziua
Paragraf
în care ecvideele ce suferă de boala în cauză sunt tăiate;
Paragraf
- în cazul anemiei infecţioase, până la data la care animalele infectate care
Paragraf
au fost tăiate, iar animalele rămase au prezentat o reacţie negativă la cele două
Paragraf
teste Coggins efectuate la interval de 3 luni;
Paragraf
- timp de 6 luni de la ultimul caz, în cazul stomatitei veziculoase;
Paragraf
- timp de o lună de la ultimul caz, în cazul rabiei;
Paragraf
- timp de 15 zile de la ultimul caz, în cazul antraxului;
Paragraf
- dacă toate animalele din speciile sensibile la boală situate în exploataţie
Paragraf
au fost tăiate, iar incinta a fost dezinfectată timp de 30 de zile, începând cu
Paragraf
ziua în care animalele au fost distruse şi incinta a fost dezinfectată, cu
Paragraf
excepţia antraxului, când perioada de interdicţie este de 15 zile;
Paragraf 5
din cunoştinţele mele, nu a(u) venit în contact cu ecvideele ce suferă de
Paragraf
o boală infecţioasă sau contagioasă, în cele 15 zile dinaintea acestei
Paragraf
declaraţii;
Paragraf 6
în momentul inspecţiei a(u) fost corespunzător (corespunzătoare) pentru
Paragraf
a fi transportate pe traseul stabilit în conformitate cu prevederile Directivei
Paragraf 91
/628/CEE ^(d).
Paragraf
V. Prezentul certificat este valabil 10 zile.
Paragraf
Întocmit, ................. Data ....................
Paragraf
(Numele cu majuscule şi funcţia
Paragraf
medicului veterinar oficial) ^(c)
Paragraf
^(a) Această informaţie nu este solicitată dacă există un acord bilateral
Paragraf
în conformitate cu art. 6 din Directiva Consiliului 90/426/CEE.
Paragraf
^(b) Se şterge orice nu se aplică.
Paragraf
^(c) Medic veterinar autorizat.
Paragraf
^(d) Această declaraţie nu îi scuteşte pe transportatori de obligaţiile
Paragraf
acestora în conformitate cu prevederile comunitare în vigoare, în special cele
Paragraf
privitoare la condiţia fizică a animalelor ce urmează a fi transportate.
Paragraf
Anexa 3 a fost modificată de pct. 21 al art. II din ORDINUL nr. 43 din 22 februarie 2007, publicat în MONITORUL OFICIAL nr. 155 din 5 martie 2007.
ANX
Anexa 4
Paragraf
la norma sanitara veterinara
Paragraf
PESTA ECVINĂ
Paragraf
DIAGNOSTIC
Paragraf
Reactivii pentru tehnicile imunoabsorbante înlănţuite enzimatic (ELISA) descrise mai jos pot fi obţinuţi de la Laboratorul de Referinţă al Comunităţii Europene sau de la Laboratoarele de Referinţă ale 0IE pentru pestă ecvină.
Paragraf 1
TEST ELISA DE COMPETIŢIE PENTRU DETECTAREA PREZENŢEI ANTICORPILOR ÎMPOTRIVA VIRUSULUI PESTEI ECVINE (VPE) (TEST PRESCRIS)
Paragraf
Testul ELISA de competiţie este folosit pentru a detecta anticorpi specifici VPE în ser provenind de la oricare din speciile de ecvidee. Antiserul de cobai contra VPE (denumit în continuare antiser de cobai) este un antiser cu spectru larg, policlonal şi imun, specific serogrupului şi permite detectarea tuturor serotipurilor cunoscute de virus ale acestei maladii.
Paragraf
Principiul testului este întreruperea reacţiei între antigenul VPE şi antiserul de cobai de către o probă de ser de testat. Anticorpii de VPE din proba de ser de testat vor fi în competiţie cu aceia din antiserul de cobai, rezultând o reducere a culorii aşteptate (după adăugarea anticorpilor anti-cobai marcaţi enzimatic şi a substratului). Serul poate fi testat la o singură diluţie de 1/5 (metoda testului punctual) sau poate fi titrat (metoda titrării serului) pentru a determina valorile finale ale diluţiei. Valorile de inhibiţie mai mari de 50% pot fi considerate ca fiind pozitive.
Paragraf
Protocolul testului descris mai sus este folosit în Laboratorul de Referinţă Regional pentru Pestă Ecvină, Pirbright, Marea Britanie.
Paragraf 1
Procedura de testare
Paragraf 1
Pregătirea plăcilor
Paragraf 1
Se acoperă plăcile pentru ELISA cu antigen VPE extras din culturile celulare infectate şi diluat în soluţie tampon carbonată/bicarbonată, la un pH de 9,6. Plăcile de ELISA se incubează peste noapte la 4°C.
Paragraf 1
2. Se spală plăcile de trei ori prin inundarea şi golirea godeurilor cu soluţie salină fosfată tamponată (SSFT), cu pH de la 7,2 la 7,4, şi se usucă pe hârtie adsorbantă.
Paragraf 1
2. Godeuri de control
Paragraf 1
2.1. Se titrează serul pozitiv de control într-o serie de diluţie dublă, de la 1/5 ia 1/640, de-a lungul coloanei 1 în soluţia tampon de blocare (SFT care conţine 0,05 % (v/v) Tween-20, 5,0 % (w/v) lapte praf smântânit (Cadbury's Marvel^TM)şi 1,0 % (v/v) ser de la bovine adulte) pentru a reieşi un volum total de 50 f2æl/godeu.
Paragraf 1
2.2. Se adaugă 50 f2æl din serul negativ de control, la o diluţie de 1/5 (10 f2æl de ser + 40 æl de soluţie tampon de blocare) în godeurile A şi B ale coloanei 2.
Paragraf 1
2.3. Se adaugă 100 f2æl/godeu din soluţia tampon de blocare, în godeurile C şi D ale coloanei 2 (goale).
Paragraf 1
2.4. Se adaugă 50 f2æl din soluţia tampon de blocare în godeurile E, F, G şi H ale coloanei 2 (cu ser de cobai de control).
Paragraf 1
3. Metoda testului punctual
Paragraf 1
3.1. Se adaugă câte o diluţie 1/5 din fiecare ser de testat în soluţia tampon de blocare, în godeurile corespunzătoare din coloanele de la 3 la 12 (10/f2æl ser + 40 æl de soluţie tampon de blocare);
Paragraf
sau
Paragraf 1
4. Metoda de titrare a serului
Paragraf 1
4.1. Se prepară o serie dublă de diluţie pentru fiecare probă de testat (de la 1/5 la 1/640) în soluţie tampon de blocare, în 8 godeuri ale coloanelor solitare de la 3 la 12.
Paragraf
apoi
Paragraf 1
5. Se adaugă 50 f2æl de antiser de cobai, prediluat în soluţie tampon de blocare, în toate godeurile plăcii pentru ELISA, exceptându-le pe cele goale (toate godeurile conţin acum un volum final de 100 f2æl).
Paragraf 1
5.1. Se incubează timp de o oră la 37 °C pe un agitator orbital.
Paragraf 1
5.2. Plăcile se spală de trei ori şi se usucă ca mai sus.
Paragraf 1
5.3. Se adaugă 50 f2æl de ser de iepure anti-cobai conjugat cu peroxidază din hrean, diluat în prealabil în soluţie tampon de blocare, în fiecare godeu.
Paragraf 1
5.4. Se incubează timp de o oră la 37 °C pe un agitator orbital.
Paragraf 1
5.5. Plăcile se spală de trei ori şi se usucă ca mai sus.
Paragraf 1
6. Cromogen
Paragraf
Se prepară soluţia de cromogen OFD (orto-fenildiamină) conform instrucţiunilor producătorului (0,4 mg/ml în apă distilată sterilă), exact înainte de utilizare. Se adaugă substratul [peroxid de hidrogen H(2)O(2)] pentru a rezultă o concentraţie finală de 0,05% (v/v) (1/2.000 dintr-o soluţie de H(2)O(2) 30%). Se adaugă 50 f2æl de soluţie OFD în fiecare godeu şi se lasă plăcile pe bancă timp de 10 minute la temperatura camerei. Se opreşte reacţia prin adăugarea de 50 f2æl/godeu de acid sulfuric [H(2)SO(4)] 1 M.
Paragraf
Pct. 1.1.6. al anexei 4 a fost modificat de pct. 22 al art. II din ORDINUL nr. 43 din 22 februarie 2007, publicat în MONITORUL OFICIAL nr. 155 din 5 martie 2007.
Paragraf 1
7. Citirea
Paragraf
Se citesc spectrofotometric la 492 nm.
Paragraf 1
2. Exprimarea rezultatelor
Paragraf 1
2.1. Utilizându-se un computer, se determină valorile densităţii optice (DO) şi procentul de inhibiţie (PI) pentru serul de testat şi cel de control pe baza valorii medii înregistrate în cele 4 godeuri de control cu ser de cobai. Datele exprimate ca valori DO şi PI sunt utilizate pentru a se determina dacă testul s-a efectuat în limite acceptabile. Limitele superioare de control (LSC) şi limitele inferioare de control (LIC) pentru serul de cobai de control se situează între valorile 1,4 şi, respectiv, 0,4 ale DO. Titrul punctului final pentru controlul pozitiv bazat pe un PI de 50% trebuie să fie de 1/240 (în limitele cuprinse între 1/120 şi 1/480). Orice placă ce nu se conformează criteriilor de mai sus trebuie respinsă. Totuşi, dacă titrul serului pozitiv de control este mai mare de 1/480, iar probele de testat sunt tot negative, atunci probele de testat negative pot fi acceptate.
Paragraf
Godeurile duplicat cu seruri negative de control şi godeurile duplicat goale trebuie să înregistreze valori ale PI între +25% şi -25% şi, respectiv, între +95% şi +105%. Neîncadrarea în aceste limite nu face placa să fie nevalidă, dar sugerează că se dezvoltă culoarea de fond.
Paragraf
Pct. 1.2.1. al anexei 4 a fost modificat de pct. 23 al art. II din ORDINUL nr. 43 din 22 februarie 2007, publicat în MONITORUL OFICIAL nr. 155 din 5 martie 2007.
Paragraf 1
2.2. Pragul de diagnostic (valoarea finală) pentru serul de testat este de 50 % (PI 50 %). Probele care înregistrează valori ale PI mai mari de 50 % sunt înregistrate drept pozitive. Probele care înregistrează valori ale PI mai mici de 50 % sunt înregistrate ca negative.
Paragraf
Probele care înregistrează valori ale PI peste şi sub pragul pentru godeurile duplicat sunt considerate a fi neconcludente. Astfel de probe pot fi retestate prin testul punctual sau prin titrare. Probele pozitive pot de asemenea să fie titrate pentru a furniza o indicare a gradului de pozitivare.
Paragraf
Testul punctual
PRE
PRE PRE_715
PAR
Linie PRE 1
PAR
Linie PRE 2
PAR
Linie PRE 3
PAR
Linie PRE 4
PAR
Linie PRE 5
PAR
Linie PRE 6
PAR
Linie PRE 7
PAR
Linie PRE 8
PAR
Linie PRE 9
PAR
Linie PRE 10
PAR
Linie PRE 11
PAR
Linie PRE 12
PAR
Linie PRE 13
PAR
Linie PRE 14
PAR
Linie PRE 15
PAR
Linie PRE 16
PAR
Linie PRE 17
PAR
Linie PRE 18
PAR
Linie PRE 19
PAR
Linie PRE 20
PAR
Linie PRE 21
PAR
Linie PRE 22
PAR
Linie PRE 23
PAR
Linie PRE 24
PAR
Linie PRE 25
PAR
Linie PRE 26
PAR
Linie PRE 27
PAR
Linie PRE 28
PAR
Linie PRE 29
PAR
Linie PRE 30
PAR
Linie PRE 31
PAR
Linie PRE 32
PAR
Linie PRE 33
PAR
Linie PRE 34
PAR
Linie PRE 35
PAR
Linie PRE 36
PAR
Linie PRE 37
PAR
Linie PRE 38
PAR
Linie PRE 39
PAR
Linie PRE 40
PAR
Linie PRE 41
PAR
Linie PRE 42
PAR
Linie PRE 43
PAR
Linie PRE 44
PAR
Linie PRE 45
PAR
Linie PRE 46
PAR
Linie PRE 47
PAR
Linie PRE 48
PAR
Linie PRE 49
PAR
Linie PRE 50
PAR
Linie PRE 51
PAR
Linie PRE 52
PAR
Linie PRE 53
PAR
Linie PRE 54
PAR
Linie PRE 55
PAR
Linie PRE 56
PAR
Linie PRE 57
PAR
Linie PRE 58
PAR
Linie PRE 59
PAR
Linie PRE 60
PAR
Linie PRE 61
PAR
Linie PRE 62
PAR
Linie PRE 63
PAR
Linie PRE 64
PAR
Linie PRE 65
PAR
Linie PRE 66
PAR
Linie PRE 67
PAR
Linie PRE 68
PAR
Linie PRE 69
PAR
Linie PRE 70
PAR
Linie PRE 71
PAR
Linie PRE 72
PAR
Linie PRE 73
PAR
Linie PRE 74
PAR
Linie PRE 75
PAR
Linie PRE 76
PAR
Linie PRE 77
PAR
Linie PRE 78
PAR
Linie PRE 79
PAR
Linie PRE 80
PAR
Linie PRE 81
PAR
Linie PRE 82
PAR
Linie PRE 83
PAR
Linie PRE 84
PAR
Linie PRE 85
PAR
Linie PRE 86
PAR
Linie PRE 87
PAR
Linie PRE 88
PAR
Linie PRE 89
PAR
Linie PRE 90
PAR
Linie PRE 91
PAR
Linie PRE 92
PAR
Linie PRE 93
PAR
Linie PRE 94
PAR
Linie PRE 95
PAR
Linie PRE 96
PAR
Linie PRE 97
PAR
Linie PRE 98
PAR
Linie PRE 99
PAR
Linie PRE 100
PAR
Linie PRE 101
PAR
Linie PRE 102
PAR
Linie PRE 103
PAR
Linie PRE 104
PAR
Linie PRE 105
PAR
Linie PRE 106
PAR
Linie PRE 107
PAR
Linie PRE 108
PAR
Linie PRE 109
PAR
Linie PRE 110
PAR
Linie PRE 111
PAR
Linie PRE 112
PAR
Linie PRE 113
PAR
Linie PRE 114
PAR
Linie PRE 115
PAR
Linie PRE 116
PAR
Linie PRE 117
PAR
Linie PRE 118
PAR
Linie PRE 119
PAR
Linie PRE 120
PAR
Linie PRE 121
PAR
Linie PRE 122
PAR
Linie PRE 123
PAR
Linie PRE 124
PAR
Linie PRE 125
PAR
Linie PRE 126
PAR
Linie PRE 127
PAR
Linie PRE 128
PAR
Linie PRE 129
PAR
Linie PRE 130
PAR
Linie PRE 131
PAR
Linie PRE 132
PAR
Linie PRE 133
PAR
Linie PRE 134
PAR
Linie PRE 135
PAR
Linie PRE 136
PAR
Linie PRE 137
PAR
Linie PRE 138
PAR
Linie PRE 139
PAR
Linie PRE 140
PAR
Linie PRE 141
PAR
Linie PRE 142
PAR
Linie PRE 143
PAR
Linie PRE 144
PAR
Linie PRE 145
PAR
Linie PRE 146
PAR
Linie PRE 147
PAR
Linie PRE 148
PAR
Linie PRE 149
PAR
Linie PRE 150
PAR
Linie PRE 151
PAR
Linie PRE 152
PAR
Linie PRE 153
PAR
Linie PRE 154
PAR
Linie PRE 155
PAR
Linie PRE 156
PAR
Linie PRE 157
PAR
Linie PRE 158
PAR
Linie PRE 159
PAR
Linie PRE 160
PAR
Linie PRE 161
PAR
Linie PRE 162
PAR
Linie PRE 163
PAR
Linie PRE 164
PAR
Linie PRE 165
PAR
Linie PRE 166
PAR
Linie PRE 167
PAR
Linie PRE 168
PAR
Linie PRE 169
PAR
Linie PRE 170
PAR
Linie PRE 171
PAR
Linie PRE 172
PAR
Linie PRE 173
PAR
Linie PRE 174
PAR
Linie PRE 175
PAR
Linie PRE 176
PAR
Linie PRE 177
PAR
Linie PRE 178
PAR
Linie PRE 179
PAR
Linie PRE 180
PAR
Linie PRE 181
PAR
Linie PRE 182
PAR
Linie PRE 183
PAR
Linie PRE 184
PAR
Linie PRE 185
PAR
Linie PRE 186
PAR
Linie PRE 187
PAR
Linie PRE 188
PAR
Linie PRE 189
PAR
Linie PRE 190
PAR
Linie PRE 191
PAR
Linie PRE 192
PAR
Linie PRE 193
PAR
Linie PRE 194
PAR
Linie PRE 195
PAR
Linie PRE 196
PAR
Linie PRE 197
PAR
Linie PRE 198
PAR
Linie PRE 199
PAR
Linie PRE 200
PAR
Linie PRE 201
PAR
Linie PRE 202
PAR
Linie PRE 203
PAR
Linie PRE 204
PAR
Linie PRE 205
PAR
Linie PRE 206
PAR
Linie PRE 207
PAR
Linie PRE 208
PAR
Linie PRE 209
PAR
Linie PRE 210
PAR
Linie PRE 211
PAR
Linie PRE 212
PAR
Linie PRE 213
PAR
Linie PRE 214
PAR
Linie PRE 215
PAR
Linie PRE 216
PAR
Linie PRE 217
PAR
Linie PRE 218
PAR
Linie PRE 219
PAR
Linie PRE 220
PAR
Linie PRE 221
PAR
Linie PRE 222
PAR
Linie PRE 223
PAR
Linie PRE 224
PAR
Linie PRE 225
PAR
Linie PRE 226
PAR
Linie PRE 227
PAR
Linie PRE 228
PAR
Linie PRE 229
PAR
Linie PRE 230
PAR
Linie PRE 231
PAR
Linie PRE 232
PAR
Linie PRE 233
PAR
Linie PRE 234
PAR
Linie PRE 235
PAR
Linie PRE 236
PAR
Linie PRE 237
PAR
Linie PRE 238
PAR
Linie PRE 239
PAR
Linie PRE 240
PAR
Linie PRE 241
PAR
Linie PRE 242
PAR
Linie PRE 243
PAR
Linie PRE 244
PAR
Linie PRE 245
PAR
Linie PRE 246
PAR
Linie PRE 247
PAR
Linie PRE 248
PAR
Linie PRE 249
PAR
Linie PRE 250
PAR
Linie PRE 251
PAR
Linie PRE 252
PAR
Linie PRE 253
PAR
Linie PRE 254
PAR
Linie PRE 255
PAR
Linie PRE 256
PAR
Linie PRE 257
PAR
Linie PRE 258
PAR
Linie PRE 259
PAR
Linie PRE 260
PAR
Linie PRE 261
PAR
Linie PRE 262
PAR
Linie PRE 263
PAR
Linie PRE 264
PAR
Linie PRE 265
PAR
Linie PRE 266
PAR
Linie PRE 267
PAR
Linie PRE 268
PAR
Linie PRE 269
PAR
Linie PRE 270
PAR
Linie PRE 271
PAR
Linie PRE 272
PAR
Linie PRE 273
PAR
Linie PRE 274
PAR
Linie PRE 275
PAR
Linie PRE 276
PAR
Linie PRE 277
PAR
Linie PRE 278
PAR
Linie PRE 279
PAR
Linie PRE 280
PAR
Linie PRE 281
PAR
Linie PRE 282
PAR
Linie PRE 283
PAR
Linie PRE 284
PAR
Linie PRE 285
PAR
Linie PRE 286
PAR
Linie PRE 287
PAR
Linie PRE 288
PAR
Linie PRE 289
PAR
Linie PRE 290
PAR
Linie PRE 291
PAR
Linie PRE 292
PAR
Linie PRE 293
PAR
Linie PRE 294
PAR
Linie PRE 295
PAR
Linie PRE 296
PAR
Linie PRE 297
PAR
Linie PRE 298
PAR
Linie PRE 299
PAR
Linie PRE 300
PAR
Linie PRE 301
PAR
Linie PRE 302
PAR
Linie PRE 303
PAR
Linie PRE 304
PAR
Linie PRE 305
PAR
Linie PRE 306
PAR
Linie PRE 307
PAR
Linie PRE 308
PAR
Linie PRE 309
PAR
Linie PRE 310
PAR
Linie PRE 311
PAR
Linie PRE 312
PAR
Linie PRE 313
PAR
Linie PRE 314
PAR
Linie PRE 315
PAR
Linie PRE 316
PAR
Linie PRE 317
PAR
Linie PRE 318
PAR
Linie PRE 319
PAR
Linie PRE 320
PAR
Linie PRE 321
PAR
Linie PRE 322
PAR
Linie PRE 323
PAR
Linie PRE 324
PAR
Linie PRE 325
PAR
Linie PRE 326
PAR
Linie PRE 327
PAR
Linie PRE 328
PAR
Linie PRE 329
PAR
Linie PRE 330
PAR
Linie PRE 331
PAR
Linie PRE 332
PAR
Linie PRE 333
PAR
Linie PRE 334
PAR
Linie PRE 335
PAR
Linie PRE 336
PAR
Linie PRE 337
PAR
Linie PRE 338
PAR
Linie PRE 339
PAR
Linie PRE 340
PAR
Linie PRE 341
PAR
Linie PRE 342
PAR
Linie PRE 343
PAR
Linie PRE 344
PAR
Linie PRE 345
PAR
Linie PRE 346
PAR
Linie PRE 347
PAR
Linie PRE 348
PAR
Linie PRE 349
PAR
Linie PRE 350
PAR
Linie PRE 351
PAR
Linie PRE 352
PAR
Linie PRE 353
PAR
Linie PRE 354
PAR
Linie PRE 355
PAR
Linie PRE 356
PAR
Linie PRE 357
PAR
Linie PRE 358
PAR
Linie PRE 359
PAR
Linie PRE 360
PAR
Linie PRE 361
PAR
Linie PRE 362
PAR
Linie PRE 363
PAR
Linie PRE 364
PAR
Linie PRE 365
PAR
Linie PRE 366
PAR
Linie PRE 367
PAR
Linie PRE 368
PAR
Linie PRE 369
PAR
Linie PRE 370
PAR
Linie PRE 371
PAR
Linie PRE 372
PAR
Linie PRE 373
PAR
Linie PRE 374
PAR
Linie PRE 375
PAR
Linie PRE 376
PAR
Linie PRE 377
PAR
Linie PRE 378
PAR
Linie PRE 379
PAR
Linie PRE 380
PAR
Linie PRE 381
PAR
Linie PRE 382
PAR
Linie PRE 383
PAR
Linie PRE 384
PAR
Linie PRE 385
PAR
Linie PRE 386
PAR
Linie PRE 387
PAR
Linie PRE 388
PAR
Linie PRE 389
PAR
Linie PRE 390
PAR
Linie PRE 391
PAR
Linie PRE 392
PAR
Linie PRE 393
PAR
Linie PRE 394
PAR
Linie PRE 395
PAR
Linie PRE 396
PAR
Linie PRE 397
PAR
Linie PRE 398
PAR
Linie PRE 399
PAR
Linie PRE 400
PAR
Linie PRE 401
PAR
Linie PRE 402
PAR
Linie PRE 403
Paragraf
Serul pentru testat
PRE
PRE PRE_717
PAR
Linie PRE 1
PAR
Linie PRE 2
PAR
Linie PRE 3
PAR
Linie PRE 4
PAR
Linie PRE 5
PAR
Linie PRE 6
PAR
Linie PRE 7
PAR
Linie PRE 8
PAR
Linie PRE 9
PAR
Linie PRE 10
PAR
Linie PRE 11
PAR
Linie PRE 12
PAR
Linie PRE 13
PAR
Linie PRE 14
PAR
Linie PRE 15
PAR
Linie PRE 16
PAR
Linie PRE 17
PAR
Linie PRE 18
PAR
Linie PRE 19
PAR
Linie PRE 20
PAR
Linie PRE 21
PAR
Linie PRE 22
PAR
Linie PRE 23
PAR
Linie PRE 24
PAR
Linie PRE 25
PAR
Linie PRE 26
PAR
Linie PRE 27
PAR
Linie PRE 28
PAR
Linie PRE 29
PAR
Linie PRE 30
PAR
Linie PRE 31
PAR
Linie PRE 32
PAR
Linie PRE 33
PAR
Linie PRE 34
PAR
Linie PRE 35
PAR
Linie PRE 36
PAR
Linie PRE 37
PAR
Linie PRE 38
PAR
Linie PRE 39
PAR
Linie PRE 40
PAR
Linie PRE 41
PAR
Linie PRE 42
PAR
Linie PRE 43
PAR
Linie PRE 44
PAR
Linie PRE 45
PAR
Linie PRE 46
PAR
Linie PRE 47
PAR
Linie PRE 48
PAR
Linie PRE 49
PAR
Linie PRE 50
PAR
Linie PRE 51
PAR
Linie PRE 52
PAR
Linie PRE 53
PAR
Linie PRE 54
PAR
Linie PRE 55
PAR
Linie PRE 56
PAR
Linie PRE 57
PAR
Linie PRE 58
PAR
Linie PRE 59
PAR
Linie PRE 60
PAR
Linie PRE 61
PAR
Linie PRE 62
PAR
Linie PRE 63
PAR
Linie PRE 64
PAR
Linie PRE 65
PAR
Linie PRE 66
PAR
Linie PRE 67
PAR
Linie PRE 68
PAR
Linie PRE 69
PAR
Linie PRE 70
PAR
Linie PRE 71
PAR
Linie PRE 72
PAR
Linie PRE 73
PAR
Linie PRE 74
PAR
Linie PRE 75
PAR
Linie PRE 76
PAR
Linie PRE 77
PAR
Linie PRE 78
PAR
Linie PRE 79
PAR
Linie PRE 80
PAR
Linie PRE 81
PAR
Linie PRE 82
PAR
Linie PRE 83
PAR
Linie PRE 84
PAR
Linie PRE 85
PAR
Linie PRE 86
PAR
Linie PRE 87
PAR
Linie PRE 88
PAR
Linie PRE 89
PAR
Linie PRE 90
PAR
Linie PRE 91
PAR
Linie PRE 92
PAR
Linie PRE 93
PAR
Linie PRE 94
PAR
Linie PRE 95
PAR
Linie PRE 96
PAR
Linie PRE 97
PAR
Linie PRE 98
PAR
Linie PRE 99
PAR
Linie PRE 100
PAR
Linie PRE 101
PAR
Linie PRE 102
PAR
Linie PRE 103
PAR
Linie PRE 104
PAR
Linie PRE 105
PAR
Linie PRE 106
PAR
Linie PRE 107
PAR
Linie PRE 108
PAR
Linie PRE 109
PAR
Linie PRE 110
PAR
Linie PRE 111
PAR
Linie PRE 112
PAR
Linie PRE 113
PAR
Linie PRE 114
PAR
Linie PRE 115
PAR
Linie PRE 116
PAR
Linie PRE 117
PAR
Linie PRE 118
PAR
Linie PRE 119
PAR
Linie PRE 120
PAR
Linie PRE 121
PAR
Linie PRE 122
PAR
Linie PRE 123
PAR
Linie PRE 124
PAR
Linie PRE 125
PAR
Linie PRE 126
PAR
Linie PRE 127
PAR
Linie PRE 128
PAR
Linie PRE 129
PAR
Linie PRE 130
PAR
Linie PRE 131
PAR
Linie PRE 132
PAR
Linie PRE 133
PAR
Linie PRE 134
PAR
Linie PRE 135
PAR
Linie PRE 136
PAR
Linie PRE 137
PAR
Linie PRE 138
PAR
Linie PRE 139
PAR
Linie PRE 140
PAR
Linie PRE 141
PAR
Linie PRE 142
PAR
Linie PRE 143
PAR
Linie PRE 144
PAR
Linie PRE 145
PAR
Linie PRE 146
PAR
Linie PRE 147
PAR
Linie PRE 148
PAR
Linie PRE 149
PAR
Linie PRE 150
PAR
Linie PRE 151
PAR
Linie PRE 152
PAR
Linie PRE 153
PAR
Linie PRE 154
PAR
Linie PRE 155
PAR
Linie PRE 156
PAR
Linie PRE 157
PAR
Linie PRE 158
PAR
Linie PRE 159
PAR
Linie PRE 160
PAR
Linie PRE 161
PAR
Linie PRE 162
PAR
Linie PRE 163
PAR
Linie PRE 164
PAR
Linie PRE 165
PAR
Linie PRE 166
PAR
Linie PRE 167
PAR
Linie PRE 168
PAR
Linie PRE 169
PAR
Linie PRE 170
PAR
Linie PRE 171
PAR
Linie PRE 172
PAR
Linie PRE 173
PAR
Linie PRE 174
PAR
Linie PRE 175
PAR
Linie PRE 176
PAR
Linie PRE 177
PAR
Linie PRE 178
PAR
Linie PRE 179
PAR
Linie PRE 180
PAR
Linie PRE 181
PAR
Linie PRE 182
PAR
Linie PRE 183
PAR
Linie PRE 184
PAR
Linie PRE 185
PAR
Linie PRE 186
PAR
Linie PRE 187
PAR
Linie PRE 188
PAR
Linie PRE 189
PAR
Linie PRE 190
PAR
Linie PRE 191
PAR
Linie PRE 192
PAR
Linie PRE 193
PAR
Linie PRE 194
PAR
Linie PRE 195
PAR
Linie PRE 196
PAR
Linie PRE 197
PAR
Linie PRE 198
PAR
Linie PRE 199
PAR
Linie PRE 200
PAR
Linie PRE 201
Paragraf 2
TESTUL ELISA INDIRECT PENTRU DETECTAREA ANTICORPILOR ÎMPOTRIVA VIRUSULUI PESTEI ECVINE (AVPE) (TEST PRESCRIS)
Paragraf
Testul descris mai jos este în concordanţă cu descrierea testului de la capitolul 2.1.11 al Manualului de Standarde pentru Testele de Diagnostic şi Vaccinuri al OIE, ediţia a patra, 2000.
Paragraf
Proteina recombinată VP7 a fost utilizată ca antigen pentru determinarea anticorpilor împotriva VPE, având un mare indice de sensibilitate şi specificitate. Alt avantaj este faptul că este stabil şi nu este infectant.
Paragraf 2
1. Procedura de testare
Paragraf 2
1.1. Faza solidă
Paragraf 2
1.1.1. Plăcile de ELISA sunt acoperite cu AVPE-4 VP7 diluaţi în soluţie tampon carbonată/bicarbonată cu pH de 9,6. Plăcile se incubează peste noapte la temperatura de 4°C.
Paragraf 2
1.1.2. Plăcile se spală de cinci ori cu apă distilată care conţine 0,01 % (v/v) Tween 20 (soluţie de spălare). Plăcile se tamponează uşor cu material absorbant pentru a îndepărta reziduurile de la spălare.
Paragraf 2
1.1.3. Plăcile se blochează cu soluţie salină fosfată tamponată (SSFT) + 5 % (w/v) lapte smântânit (lapte praf smântânit Nestle^TM), 200 f2æl/godeu, timp de o oră, la 37°C.
Paragraf 2
1.1.4. Se îndepărtează soluţia de blocare şi se tamponează uşor plăcile cu un material absorbant.
Paragraf 2
1.2. Probele de testat
Paragraf 2
1.2.1. Probele de ser ce urmează a fi testate şi serul de control pozitiv şi negativ, sunt diluate 1/25 în SSFT + 5 % (w/v) lapte smântânit + 0,05 % (v/v) Tween 20, câte 100 f2æl pe godeu. Se incubează timp de o oră la 37°C.
Paragraf 2
1.2.2. Se spală plăcile aşa cum este descris la punctul 2.1.1.2.
Paragraf 2
1.3. Conjugatul
Paragraf 2
1.3.1. Se dispersează câte 100 f2æl pe godeu de gama-globuline anti-cal conjugate cu peroxidază din hrean, diluate în SFT + 5 % lapte + 0,05 % Tween 20, la un pH de 7,2. Se incubează o oră la 37°C.
Paragraf 2
1.3.2. Se spală plăcile aşa cum este descris la punctul 2.1.1.2.
Paragraf 2
1.4. Cromogen/Substrat
Paragraf 2
1.4.1. Se adaugă 200 f2æl pe godeu de soluţie de cromogen/ substrat (10 ml de soluţie de 80,6 mM de DMAB (dimetil amino benzaldehidă) + 10 ml de soluţie 1.56 mM de MBTHC (3-metil-2-benzo-tiazolină hidrazonă clorhidrat) + 5 f2æl H(2)0(2)).
Paragraf
Dezvoltarea culorii este oprită prin adăugarea a 50 f2æl H(2)SO(4) 3N după aproximativ 5-10 minute (înainte ca testul negativ de control să înceapă să se coloreze).
Paragraf
Alţi cromogeni, ca ABTS (2,2'-azino-bis-[3-etilbenzotiazolină-6-acid sulfonic]), TMB (tetrametil benzidină), sau OFD (orto-fenildiamină) pot fi de asemenea utilizate.
Paragraf 2
1.4.2. Plăcile se citesc la 600 nm (sau 620 nm).
Paragraf 2
Interpretarea rezultatelor
Paragraf 2
1. Valoarea finală se calculează adăugând 0,6 la valoarea testului de control negativ (0,6 este valoarea standard de deviaţie derivată cu un grup de 30 de probe de ser negative).
Paragraf 2
Probele de testat care dau valori ale absorbţiei mai mici decât valorile finale sunt considerate ca negative.
Paragraf 2
3. Probele de testat care dau valori ale absorbţiei mai mari decât valorile finale +0,15 sunt considerate ca fiind pozitive.
Paragraf 2
4. Probele de testat care dau valori intermediare ale absorbţiei sunt neconcludente şi trebuie aplicată o a doua tehnică pentru a confirma rezultatele.
Paragraf 3
TESTUL ELISA DE BLOCARE PENTRU DETECTAREA ANTICORPILOR ÎMPOTRIVA VIRUSULUI PESTEI ECVINE (AVPE) (TEST PRESCRIS)
Paragraf
Testul ELISA de blocare este destinat detectării anticorpilor AVPE specifici din serul speciilor susceptibile. VP7 este proteina virală antigenică majoră a VPE şi este conservată în cadrul a 9 serotipuri. Datorită faptului că anticorpul monoclonal (Acm) este de asemenea direcţionat împotriva lui VP7, proba va avea un înalt nivel de sensibilitate şi specificitate. Mai departe, antigenul VP7 recombinat este total inofensiv şi de aceea este garantat un grad mare de siguranţă.
Paragraf
Principiul testului este întreruperea reacţiei dintre antigenul recombinat VP7, ca antigen legat de placa pentru ELISA, şi Acm conjugat, rezultând o reducere a culorii.
Paragraf
Testul descris în continuare este efectuat în cadrul Laboratorului European de Referinţă pentru Pesta Ecvină din Algete, Spania.
Paragraf 3
1. Procedura de testare
Paragraf 3
1.1. Plăcile pentru ELISA
Paragraf 3
1.1.1. Se acoperă plăcile pentru ELISA cu AVPE-4 VP7 recombinat, diluat în soluţie tampon carbonată/ bicarbonată, cu pH de 9,6. Se incubează peste noapte la 4°C.
Paragraf 3
1.1.2. Plăcile se spală de cinci ori cu soluţie salină fosfată tamponată (SSFT) care conţine 0,05 % (v/v) Tween 20 (SSFTT).
Paragraf 3
1.1.3. Placa se stabilizează prin tratare cu o soluţie stabilizatoare (pentru a permite stocarea pe termen lung la temperatura de 4°C fără pierderea activităţii) şi se usucă pe material adsorbant.
Paragraf 3
1.2. Probele de testat şi controale
Paragraf 3
1.2.1. Pentru verificare: - se diluează 1/10 serurile de testat şi cele de control în SFTT, direct pe placă, pentru a se obţine un volum final de 100 f2æl/godeu. Se incubează o oră la 37°C.
Paragraf 3
1.2.2. Pentru titrare: se prepară o serie dublă de diluţie din serurile de testat şi testele de control pozitive (100 f2æl/godeu) de la 1/10 la 1/1.280 în 8 godeuri. Probele de control negative sunt testate la o diluţie de 1/10.
Paragraf
Pct. 3.1.2.2. al anexei 4 a fost modificat de pct. 24 al art. II din ORDINUL nr. 43 din 22 februarie 2007, publicat în MONITORUL OFICIAL nr. 155 din 5 martie 2007.
Paragraf 3
1.3. Conjugatul
Paragraf
Se adaugă Acm (anticorp monoclonal specific pentru VP7) conjugat cu peroxidază din hrean, prediluat, câte 50 f2æl/godeu în fiecare godeu şi se amestecă uşor pentru a asigura omogenizarea. Se incubează timp de 30 de minute la 37°C.
Paragraf 3
1.4. Se spală plăcile de cinci ori cu SSFTT şi se usucă aşa cum a fost descris mai sus.
Paragraf 3
1.5. Cromogen/ Substrat
Paragraf
Se adaugă câte 100 f2æl/godeu de soluţie de cromogen/ substrat (1 ml ABTS (2,2'-azino-bis-[3-etilbenzotiazolină-6-acid sulfonic])5 mg/ml + 9 ml de soluţie tampon de substrat (soluţie tampon de fosfat-citrat 0,1 M cu pH de 4, care conţine H(2)O(2) 0,03 %] şi se incubează timp de 10 minute la temperatura camerei. Dezvoltarea culorii este oprită prin adăugarea a 100 f2æl/godeu de SDS 2 % (Sulfat dodecil de sodiu).
Paragraf 3
1.6. Citirea
Paragraf
Se Citesc la 405 nm la un cititor pentru ELISA.
Paragraf 3
2. Interpretarea rezultatelor
Paragraf 3
2.1. Validarea probelor
Paragraf
Testul este valid atunci când densitatea optica (DO) a testului de control negativ (TCN) este mai mare de 1,0 şi DO a testului de control pozitiv (TCP) este mai mică de 0,2.
Paragraf 3
2.2. Calcularea valorii finale
Paragraf
Valoare finală pozitivă = TCN - ((TCN -TCP)x 0,3)
Paragraf
Valoare finală negativă = TCN - ((TCN -TCP)x 0,2),
Paragraf
unde TCN este DO a testului de control negativ, iar TCP este DO a testului de control pozitiv.
Paragraf 3
2.3. Interpretarea rezultatelor
Paragraf
Probele cu DO mai mică decât valoarea finală pozitivă trebuie să fie considerate drept pozitive pentru anticorpii VPE.
Paragraf
Probele cu DO mai mare decât valoarea finală negativă trebuie să fie considerate drept negative pentru anticorpii VPE.
Paragraf
Probele cu DO situată între aceste două valori trebuie să fie considerate neconcludente şi să fie recoltate de la animale după două sau trei săptămâni.
Paragraf
Pct. 3.2.3. al anexei 4 a fost modificat de pct. 25 al art. II din ORDINUL nr. 43 din 22 februarie 2007, publicat în MONITORUL OFICIAL nr. 155 din 5 martie 2007.
Vrei mai mult?
Accesează jurisprudența, primește notificări la modificări și folosește AI-ul complet.
Începe gratuit